Nuclear and Cytoplasmic Protein Extraction Kit

【保存條件】

 -20℃保存一年 【使用建議（僅供參考）】 

1. 準備溶液：室溫融解試劑盒中的三種試劑，溶解后立即放置在冰上，混勻。取適當量的細 胞漿蛋白抽提試劑 CE I/II 及細胞核蛋白抽提試劑 NE 備用，在使用前數(shù)分鐘內加入蛋白酶 抑制劑混合物及 PMSF，使 PMSF 的最終濃度為 1mM（現(xiàn)配現(xiàn)用）。

 A: 對于貼壁細胞：用 PBS 洗一遍，用細胞刮子刮下細胞，或用 EDTA 溶液處理細胞使細胞 不再貼壁很緊，并用移液器吹打下細胞。離心收集細胞，盡最大努力吸盡上清，留下細胞沉 淀備用。（注：盡量避免用胰酶消化細胞，以免胰酶降解需抽提的目的蛋白。）

 B: 對于懸浮細胞：用預冷的 PBS 清洗一遍，離心收集細胞，盡最大努力吸盡上清，留下細 胞沉淀備用。 2. 每 20 微升細胞沉淀加入 100 微升添加了 PMSF 和蛋白酶抑制劑的細胞漿蛋白抽提試劑 CE I。（對于 200 萬 HeLa 細胞，其細胞沉淀的體積大約為 20 微升或 40 毫克。)