儲存條件

該試劑盒置于室溫(15-25℃)干燥條件下，可保存12個月，更長時間的保存可置于2-8℃。2-8℃保存條件下，若溶液產(chǎn)生沉淀，使用前應(yīng)將試劑盒內(nèi)的溶液在室溫放置一段時間，必要時可在37℃水浴中預(yù)熱10 min，以溶解沉淀。第一次使用前將RNase A加入溶液P1中，混勻后置于2-8℃保存，可穩(wěn)定保存12個月以上。單獨包裝的RNase A 在室溫可穩(wěn)定保存12個月以上。

產(chǎn)品簡介

本試劑盒采用堿裂解法裂解細(xì)胞，通過離心吸附柱在高鹽狀態(tài)下特異性地結(jié)合溶液中的DNA。離心吸附柱中采用的硅基質(zhì)材料為本公司新型材料，高效、專一吸附DNA，可去除雜質(zhì)蛋白及細(xì)胞中其他有機(jī)化合物。以下操作步驟適用于提取5-15 ml過夜培養(yǎng)的大腸桿菌，質(zhì)粒提取得率和質(zhì)量與宿主菌的種類和培養(yǎng)條件，細(xì)胞的裂解，質(zhì)粒拷貝數(shù)，質(zhì)粒的穩(wěn)定性，抗生素等因素有關(guān)。使用本試劑盒提取的質(zhì)粒DNA可適用于各種常規(guī)操作，包括酶切、PCR、測序、連接、轉(zhuǎn)化、文庫篩選、體外翻譯、轉(zhuǎn)染一些常規(guī)的傳代細(xì)胞等。

注意事項 請務(wù)必在使用本試劑盒之前閱讀此注意事項。

1.溶液 P1 在使用前先加入 RNase A（將試劑盒中提供的 RNase A 全部加入），混勻，置于 2-8℃保存。

2.使用前先檢查溶液 P2 和 P3 是否出現(xiàn)渾濁，如有混濁現(xiàn)象，可在 37℃水浴中加熱幾分鐘，即可恢復(fù)澄清。

3.注意不要直接接觸溶液 P2 和 P3，使用后應(yīng)立即蓋緊蓋子。

4.所有離心步驟均為使用臺式離心機(jī)室溫下進(jìn)行離心，速度為 12,000 rpm (~13,400×g )。

5.提取的質(zhì)粒量與細(xì)菌培養(yǎng)濃度、質(zhì)粒拷貝數(shù)等因素有關(guān)。如果所提質(zhì)粒為低拷貝質(zhì)?；虼笥?10 kb 的大質(zhì)粒，應(yīng)加大菌體使用量，同時按比例增加 P1、P2、P3 的用量，洗脫緩沖液應(yīng)在 65-70℃預(yù)熱。可以適當(dāng)?shù)难娱L吸附和洗脫的時間，以增加提取效率。

操作步驟

使用前請先在漂洗液PW中加入無水乙醇，加入體積請參照瓶上的標(biāo)簽。

1.取5-15 ml過夜培養(yǎng)的菌液加入離心管中，12,000 rpm (~13,400×g )離心1 min，盡量吸除上清。